创新参选：细胞冻存方法的改进

“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。为了感谢这些分享实验技巧的参选者，生物通将于2010年8月10日从在此之前投稿的参选者中抽出三名，送出世博会门票一张。

　　

“赛默飞世尔特约之2010实验室创新技术大奖”评选活动开展以来，生物通已经陆陆续续收到不少项目，这些项目中有的能减少实验步骤，有的能降低实验成本，还有一些改进了实验设备，让我们的实验过程更加轻松。

目前生物通已经公布了一些项目，这些项目也倍受读者的关注。为了感谢这些分享实验技巧的参选者，生物通将于2010年8月10日进行第二轮抽奖，从在此之前投稿的参选者中抽出三名，送出上海世博会门票一张。

浙江大学的茵梓博士对细胞冻存方法进行了改进。

参选项目：细胞冻存方法的改进

背景：细胞冻存是细胞培养的重要环节之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存，可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来，这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞，可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种，起到了细胞保种的作用。

冻存技术要点是慢冻，标准的冻存程序为降温速率-1～-2℃/ min；当温度达-25℃以下时，可增至-5℃～-10℃/min。我们常用的传统方法是将冻存管置于4℃30分钟--->-20℃60分钟--->-80℃过夜--->液氮罐。但是由于步骤较多，时间间隔较长，很容易遗忘。但是任何一个步骤的拖延都会严重影响细胞存活。而市面上程序冷冻仪又价格昂贵，必要性也不高，不是每个实验室都拥有的。

方法改进：我们考虑到泡沫塑料有很好的保温隔热效果，同时又注意到我们购买的BD公司的15ml离心管包装里的泡沫塑料孔径与冻存管相当。我们改进的冻存方法是：可将细胞冻存管放入泡沫支架中，再加盖一块同样的泡沫支架后，直接放入-80℃冰箱过夜后转移进液氮罐。该方法不但利用了废物利于环保，而且省时省心，非常便捷有效。

结果：经我们多次实验证实，这种方法冻存细胞的复苏效果理想，细胞存活率在90%以上。

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